目的:探讨高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/ MS)法测定人血浆头孢克肟浓度的不确定度。方法对HPLC-MS/ MS 法测定血浆头孢克肟浓度的全过程进行分析,包括测定重复性、称量、标准溶液的配制、血浆样本的处理、仪器、标准曲线拟合等,计算合成不确定度和扩展不确定度。结果置信概率为95%时,血浆低(80 ng?mL-1)、中(560 ng?mL-1)、高(9600 ng?mL-1)浓度头孢克肟的扩展不确定度分别为14.93,23.65,137.95 ng?mL-1。结论HPLC-MS/ MS 法测定血浆头孢克肟浓度含量的不确定度主要由标准曲线的拟合、重复性及仪器允差引入。