SEMA3B基因真核表达载体的构建及对肺癌细胞恶性生物学行为的影响

• 作者: 何爽 明凯华 赵俊 郑云 陈敏
• 来源期刊: 广州医药
• 关键词: SEMA3B 克隆 基因转染 增殖 肺癌
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-8
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8535.2015.06.002

摘要

目的 构建抑癌基因SEMA3B真核表达载体pcDNA3.1-SEMA3B,并检测其对肺癌A549细胞恶性生物学行为的影响.方法 应用PCR扩增SEMA3B全长cDNA片段,构建真核表达载体pcDNA3.1-SEMA3B.克隆PCR、双酶切法、基因测序验证过表达载体构建成功.将pcDNA3.1-SEMA3B真核表达载体和空载体pcDNA3.1分别转染入A549细胞中,应用qRT-PCR、Western blot检测SEMA3B mRNA、蛋白表达水平的变化;MTS法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期;克隆形成实验检测细胞集落形成能力.结果 SEMA3B基因扩增片段与预测片段一致,克隆成功,且测序鉴定证实真核表达载体构建成功.转染pcDNA3.1-SEMA3B真核表达载体可上调SEMA3BmRNA、蛋白表达水平,且可抑制A549细胞的增殖,诱导凋细胞亡,细胞被阻滞在G1期,抑制细胞集落形成能力.结论 成功构建了SEMA3B基因真核表达载体,抑癌基因SEMA3B在肺癌恶性生物学进程中可能发挥重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈敏		29	61	4.0	7.0
2	明凯华		2	0	0.0	0.0
3	赵俊		3	9	2.0	3.0
4	何爽		1	0	0.0	0.0
5	郑云		1	0	0.0	0.0