上调NPRL2表达对神经胶质瘤SHG44和U251细胞增殖的抑制作用

• 作者: 田琪 程远 黄宁
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 神经胶质瘤 细胞增殖 细胞周期 小鼠,裸 NPRL2基因
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1304-1313
• 页数: 10页
• 分类号: R739.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2015.11.586

摘要

目的:探讨抑癌基因NPRL2(nitrogen permease regulator like-2)过表达对人神经胶质瘤SHG44和U251细胞增殖的影响及其可能的作用机制.方法:将NPRL2过表达的重组慢病毒LV-NPRL2感染SHG44和U251细胞后,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞中NPRL2mRNA和蛋白的表达水平,CCK-8和FCM法检测细胞增殖和细胞周期,蛋白质印迹法检测磷酸化3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(phospho-3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1,p-PDK1)、磷酸化蛋白激酶B1(phospho-protein kinase B1,p-PKB1,又称p-Akt1)、p27和p21蛋白的表达水平,应用酶联免疫检测仪检测细胞中PDK1、Akt1、细胞周期蛋白依赖性激酶2 (cyclin-dependent kinase 2,CDK2)和CDK4的活性.裸鼠皮下成瘤实验观察NPRL2过表达对SHG44和U251细胞致瘤性的影响,免疫组织化学法检测裸鼠移植瘤组织中增殖细胞核抗原(proliferating cel1 nuclear antigen,PCNA)和Ki-67增殖指数的变化.结果:LV-NPRL2感染组SHG44和U251细胞中NPRL2 mRNA和蛋白的表达水平均显著高于阴性对照组[SHG44和U251细胞感染阴性对照慢病毒(lentivirus-negative control,LV-NC)]和空白对照组(SHG44和U251细胞未感染任何慢病毒)(P值均＜ 0.01).LV-NPRL2感染组SHG44和U251细胞的增殖受到抑制(P值均＜0.05),G0/G1期细胞所占百分比显著上升(P值均＜0.01),S期细胞所占百分比显著下降(P值均＜0.01),p-PDK1和p-Akt1蛋白的表达水平下调(P值均＜0.01),p21和p27蛋白的表达水平上调(P值均＜0.01),PDK1、Akt1、CDK2和CDK4的活性水平显著下降(P值均＜ 0.01).LV-NPRL2感染组SHG44和U251细胞在裸鼠皮下的成瘤能力(P＜0.05)以及移植瘤组织中PCNA和Ki-67的增殖指数显著低于阴性对照组(P值均＜ 0.01).结论:NPRL2过表达可以抑制人神经胶质瘤SHG44和U251细胞的增殖,其机制可能与抑制PDK1/Akt1信号转导通路有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程远		117	678	13.0	21.0
2	黄宁		4	2	1.0	1.0
3	田琪		1	0	0.0	0.0