银杏苦内酯B对脂多糖诱导的微血管内皮细胞作用的机制

• 作者: 夏时海 曹卫丽 陈凯
• 来源期刊: 中华胰腺病杂志
• 关键词: 胰腺炎,急性坏死性 银杏苦内酯类 脂多糖类 微血管 内皮细胞
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 389-393
• 页数: 5页
• 字数: 3047字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2015.06.007

摘要

目的 观察银杏苦内酯B(BN52021)对胰腺微血管内皮细胞(MS1细胞)的作用,探讨其分子机制.方法 采用MTT法确定脂多糖(LPS)抑制MS1细胞存活的最佳浓度和时间,同法确定BN52021增加LPS诱导后MS1细胞存活的最佳浓度.通过实时定量PCR、蛋白质印迹法检测血小板活化因子受体(PAFR)信号通路中腺苷酸环化酶(AC)、磷脂酶A2(PLA2)、磷脂酶C(PLCβ)、酪氨酸蛋白激酶(PTK)和G蛋白耦联受体激酶(GRK) mRNA和蛋白表达量.结果 10μg/ml LPS作用24 h为抑制MS1细胞存活的最佳浓度和作用时间.50 mmol/L BN52021是最佳干预浓度.LPS诱导后MS1细胞株AC、GRK、PLA2、PLCβ、PTK mRNA表达量分别为4.02±0.14、2.63±0.03、3.31±0.12、2.09±0.08、1.85±0.07,较对照组(均为1)明显上调;BN52021干预后MS1细胞AC、GRK、PLA2、PLCβ mRNA表达量分别为2.35±0.13、1.17±0.14、1.87±0.11、1.65±0.10,较LPS诱导组显著下调,差异均有统计学意义(P值均＜0.05),PTK mRNA表达量为1.83±0.13,与LPS诱导组差异无统计学意义.蛋白印迹法显示各基因的蛋白表达与mRNA表达的变化一致.结论 BN52021能有效地下调LPS诱导MS1细胞后PAFR信号通路中被上调的AC、GRK、PLA2和PLCβ基因表达.