麻疹病毒长-47纯化株(2BS细胞)毒种库的建立

• 作者: 张宇 李海燕 沈红杰 王玮 郑晓丽 闫磊 黄果勇
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 麻疹病毒长-47纯化株 人二倍体细胞 毒种库 基因稳定性
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 1339-1343
• 分类号: R373.1+1|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 建立以人胚肺二倍体细胞(2BS)为基质的麻疹病毒长-47纯化株毒种库.方法 将麻疹病毒长-47纯化株毒种(CEC)主代主种子批适应于2BS细胞,传至第4代和第8代,分别作为主种子批及工作种子批,对毒种进行鉴别试验、无菌试验、支原体检查、外源因子检查和病毒滴度检测,并对主种子批毒种进行猴体神经毒力试验和猴体免疫原性检测.将毒种连续传代,观察各代次病毒的收获时间,并测定病毒滴度,分析毒种的传代稳定性;将主种子批和工作种子批分别置于-20和-70℃保存,不同时间取样,检测病毒滴度,分析毒种保存温度稳定性;选取4个代次毒种(D4、D8、D15、D19)提取病毒核酸,扩增H基因序列,分析H基因在传代过程中的遗传稳定性.结果 主种子批和工作种子批毒种鉴别试验、无菌试验、支原体及外源因子检查均符合《中国药典》三部(2010版)要求,病毒滴度分别为5.88和6.00 log CCID50/ml,主种子批毒种具有良好的安全性及免疫原性.麻疹病毒长-47纯化株毒种适应于2BS细胞后,收获病毒时间一般在6～7d,病毒滴度稳定在5.5～6.5 logCCID50/ml之间.主种子批和工作种子批病毒于-20和-70℃保存10个月,病毒滴度无明显变化.D4 ～ D19代病毒无核苷酸发生改变,与麻疹病毒Chang-47(GenBank登录号:EF033071)比对结果显示,D4～D19代病毒核苷酸序列21 nt由G→C,属于同义突变,同源性达99.9％.结论 建立了麻疹病毒长-47纯化株(2BS)毒种库,并按照《中国药典》三部(2010版)要求进行了全面检定,为制备以人胚肺二倍体细胞为基质的麻疹减毒活疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄果勇		8	18	2.0	3.0
2	沈红杰		12	64	4.0	8.0
3	李海燕		5	1	1.0	1.0
4	张宇		5	13	3.0	3.0
5	闫磊		5	1	1.0	1.0
6	王玮		4	1	1.0	1.0
7	郑晓丽		4	3	1.0	1.0