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摘要:
目的 探究以MyD88为关键传导分子的TLR4下游炎症-凋亡信号通路在NEC发病过程中的作用机制.方法 采用SPF级,新生10日龄MyD88-/-幼鼠和相应的野生型幼鼠,共32只,分别按照数字表法随机分配进入NEC实验组或对照组;NEC实验组幼鼠置入自制新生保育箱内造模处理(每日人工配置鼠乳代用品喂养,5次/d;每次给予N2缺氧90 s后,快速充入O2复氧,再次置入4℃环境冷刺激10 min,3次/d,连续3 d;LPS 10mg/kg稀释于0.1 ml灭菌水中,去芯留置针头口腔插管灌胃,1次/d,连续3 d);对照组继续与母鼠同笼,鼠乳喂养.实验结束后取材回肠末端肠管组织,HE染色法组织病理评分及液相芯片细胞因子TNF-α及IL-1β检测判断各组肠道NEC炎症程度.TUNEL方法检测各组小鼠肠道细胞的凋亡水平变化.实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测各组小肠组织内TLR4炎症-凋亡通路中TRIF、IRF-3、NF-κb、Bax、Bcl-2、Caspases的mRNA表达情况.结果 与野生鼠NEC组相比,MyD88敲除鼠小肠炎症程度评分(1.63±0.52比2.75±0.46)、炎症效应分子NF-κb表达(1.38±0.25比2.33±0.76)、促炎因子IL-1β(465.57±81.59比863.58±198.28)、TNF-α(5.41±0.83比6.48±1.15)水平明显降低;肠上皮细胞凋亡明显减少(4.44±0.47比9.75±1.00),凋亡效应分子Caspases 8(2.03±0.20比4.06±0.44)、Caspases 9 (1.02±0.08比1.93±0.09)、Caspases 3(1.87±0.28比6.75±1.12)和促凋亡基因Bax(1.15±0.25比2.40±0.42)表达降低(P<0.05).MyD88非依赖通路中关键因子TRIF(1.85±0.38比1.4±0.19)和IRF-3(2.01±0.41比1.53±0.38)表达上调(P<0.05);抗凋亡基因Bcl-2(1.18±0.31比1.10±0.20)表达无变化(P>0.05).结论 ①TLR4下游的MyD88-NF-κb信号通路是NEC发病过程中重要的炎症-凋亡调控机制;①MyD88在NEC发生过程中介导了Caspase 8-外源性及Caspase 9-内源性凋亡信号通路的激活过程;②MyD88敲除后,MyD88依赖性信号通路被阻断,MyD88非依赖通路被激活,NEC炎症程度及肠上皮细胞凋亡明显降低.
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文献信息
篇名 TLR4通路关键蛋白MyD88在坏死性小肠结肠炎发病过程中的作用机制研究
来源期刊 中华小儿外科杂志 学科
关键词 小肠结肠炎,坏死性 髓样分化蛋白88 Toll样受体4 细胞凋亡
年,卷(期) 2015,(2) 所属期刊栏目 新生儿坏死性小肠结肠炎专题
研究方向 页码范围 113-120
页数 8页 分类号
字数 5880字 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2015.02.009
五维指标
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研究主题发展历程
节点文献
小肠结肠炎,坏死性
髓样分化蛋白88
Toll样受体4
细胞凋亡
研究起点
研究来源
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华小儿外科杂志
月刊
0253-3006
42-1158/R
大16开
武汉市胜利街155号
38-19
1980
chi
出版文献量(篇)
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20
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