蒙古绵羊体外受精胚胎干细胞建系培养研究

• 作者: 仓明 刘东军 吴慧 杨文亮 邰大鹏 靳木子
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 生物学
• 关键词: 绵羊 体外受精 胚胎干细胞 建系
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 28-33
• 页数: 6页
• 分类号: Q2-33
• 字数: 3910字
• 语种: 中文

摘要

蒙古绵羊体外受精的胚胎干细胞(SESC)一直未能成功建系,确定一种适合的培养体系及传代方法对其成功建系有着重要的意义.本研究将获得的体外受精胚胎直接培养,以胎鼠成纤维细胞为饲养层,运用机械传代法传代,采用培养液Ⅰ和培养液Ⅱ两种不同的培养液培养绵羊胚胎干细胞.采用形态鉴定、碱性磷酸酶染色、类胚体形成,免疫荧光染色等方法对获得的SESC进行干细胞检测.结果显示:培养液Ⅰ和培养液Ⅱ都可用于SESC的培养,而无血清的培养液Ⅱ更利于细胞的生长;机械传代法适合于SESC的传代培养;冷冻复苏之后经过形态鉴定、碱性磷酸酶染色、体外分化以及免疫荧光染色,均与胚胎干细胞的形态特征一致.