莱茵衣藻酰基辅酶A合成酶cDNA克隆及其酵母表达

• 作者: 宋燕子 林柏成 胡章立 贾彬 黄瑛
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 莱茵衣藻 酰基辅酶A合成酶 酵母YB525 进化树 脂肪酸
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 119-124
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.09.016

摘要

旨在预测并克隆莱茵衣藻酰基辅酶A合成酶cDNA（cracs），分析其在酵母中的功能。RT-PCR克隆cracs序列， ClustalW和MEGA6.0软件分别分析其编码蛋白保守序列和进化树，表达并分析其在酵母YB525中的底物偏好性。结果表明，首次在莱茵衣藻中克隆获得一个cracs，测序表明其序列大小为2004 bp，编码667个氨基酸，编码蛋白crACS的预测分子量为72.3 kD，包含酰基辅酶A合成酶的两个保守区：AMP-binding区和FACS区。进化树比对显示，crACS与拟南芥的长链酰基辅酶A合成酶LACSs具有较高的同源性。酵母表达显示cracs编码蛋白能互补酵母YB525 LACS的缺陷表型，活化并优先利用C16∶1和C14∶0。莱茵衣藻cracs编码蛋白可活化外源脂肪酸，属于酰基辅酶A合成酶家族。