目的:分析新生儿重症监护室(neonatal intensive care unit,NICU)病原菌的分布及耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法:回顾性分析NICU收集的2013年1—12月3802份临床标本分离的病原菌分布及耐药性。结果:3802份标本中,共分离出病原菌株308株,分离率为8.10%。革兰阳性球菌占54.22%,以凝固酶阴性葡萄球菌为主(占17.86%),其次为金黄色葡萄球菌(占11.36%)和溶血性葡萄球菌(占7.79%),对红霉素的耐药性均较高;革兰阴性杆菌占45.78%,前3位依次为大肠埃希菌(占22.40%)、肺炎克雷伯菌(占12.01%)、铜绿假单胞菌(占5.19%),革兰阴性杆菌对第3、4代头孢菌素、氨曲南、广谱青霉素类及结构相似的β-内酰胺类药物耐药率大于40%,对碳青霉烯类仍敏感;多重耐药菌主要为大肠埃希菌氏菌。结论:随着抗菌药物的持续使用,表皮葡萄球菌及大肠埃希菌检出率处于较高水平,应引起院内感染监测人员的密切关注,以促进临床合理用药。