斑马鱼BLT1-like基因的克隆和表达分析

• 作者: 刘晓红 吴海珍 唐宇飞 常馨月 张元兴
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 斑马鱼 BLT1 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 页码范围: 1753-1762
• 分类号: Q785|S965
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20150609926

摘要

为了研究白三烯B4受体在斑马鱼发育和免疫中的功能,本实验利用RACE技术克隆得到了斑马鱼白三烯B4受体样(BLT1-like)基因BLT1-like1和BLT1-like2的全长cDNA序列,其分别编码339和356个氨基酸.序列和结构分析发现,其编码的2个蛋白均属于G蛋白偶联受体家族视紫红质蛋白亚族,并具有典型的G蛋白偶联受体的特征,与人的BLT1同源度达31％以上.进一步将2个基因与绿色荧光蛋白融合表达,发现其具有较好的细胞膜定位功能;Western印迹检测也证实,重组表达细胞的全细胞蛋白可与人源BLT1的多克隆抗体发生特异性相互作用.此外,荧光定量PCR分析结果显示,在斑马鱼幼鱼发育过程中,BLT1-like1在胚胎发育12h显著上调,mRNA表达量上升至1h时的18倍,而BLT1-like2在胚胎发育24 h发生显著上调,表达量上升至1h时的34倍;斑马鱼成鱼中的2个基因在心脏和肝脏中表达量相对较高,而肠道、皮肤和眼睛中表达量相对较低.说明斑马鱼体内可能存在多个BLT1基因,实验结果为鱼类BLT1基因的克隆和功能鉴定提供基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张元兴	华东理工大学生物工程学院	126	951	16.0	24.0
3	吴海珍	华东理工大学生物工程学院	34	127	7.0	10.0
4	唐宇飞	华东理工大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
5	刘晓红	华东理工大学生物工程学院	2	2	1.0	1.0
9	常馨月	华东理工大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0