重组人胰岛素注射液中B3和B3iso脱氨人胰岛素的分析与鉴定

• 作者: 吴岭 吴萌 封启媛 徐军 陈小锋 龚庆伟
• 来源期刊: 分析测试学报
• 学科: 化学
• 关键词: 重组人胰岛素注射液 B3和B3iso脱氨人胰岛素 反相高效液相色谱 液相色谱-串联质谱
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1173-1178
• 页数: 6页
• 分类号: O657.72|Q578
• 字数: 4117字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4957.2015.10.014

摘要

建立了有效分离重组人胰岛素注射液中B3和B3iso脱氨人胰岛素的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,并采用高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术(HPLC-MS/MS)对其进行氨基酸序列的鉴定.在《中国药典》2010版重组人胰岛素注射液有关物质检查分析方法的基础上,优化流动相pH值,以0.2mol/L硫酸盐缓冲液(pH 3.6)-乙腈(90∶10)作为A相,乙腈-水(50∶50)为B相,梯度洗脱,分别收集杂质峰1和杂质峰2,脱盐浓缩后,用丝氨酸蛋白酶(V8酶)酶切,取部分酶切溶液经三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)还原,分别得到还原和非还原肽段溶液,利用LC-MS/MS鉴定氨基酸序列,未知杂质分别为重组人胰岛素B3位发生脱氨和异构化的产物,即B3和B3iso脱氨人胰岛素.将优化后的方法与《中国药典》方法对市售重组人胰岛素注射液进行有关物质的对比分析,已上市厂家的重组人胰岛素注射液均有不同程度的B3和B3iso脱氨人胰岛素存在.该方法不影响重组人胰岛素其它有关物质的检测,可用于监控人胰岛素注射液产品储存过程中脱氨类杂质的增长趋势.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐军	东阳光药业研究院生物药研究所	2	14	1.0	2.0
2	吴萌	东阳光药业研究院生物药研究所	1	1	1.0	1.0
3	龚庆伟	东阳光药业研究院生物药研究所	1	1	1.0	1.0
4	封启媛	东阳光药业研究院生物药研究所	1	1	1.0	1.0
5	吴岭	东阳光药业研究院生物药研究所	1	1	1.0	1.0
6	陈小锋	东阳光药业研究院生物药研究所	1	1	1.0	1.0