含N-乙酰化肝素寡糖的制备及序列分析

• 作者: 张建伟 张惠芳 林江慧 肖晓毛 高建平 魏峥
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 肝素寡糖 飞行时间质谱 肝素酶 序列测定
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 689-696
• 页数: 8页
• 字数: 5216字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11895/j.issn.0253-3820.140747

摘要

建立了含N-乙酰化肝素寡糖的分离提纯及其序列结构分析方法.首先应用肝素酶Ⅰ深度酶解低分子量肝素来富集含N-乙酰化结构寡糖,通过Bio-Gel P10凝胶色谱法分离制备了包括二糖至十四糖的系列肝素寡糖粗样品,ProPac PA-1强阴离子高效液相色谱(SAX-HPLC)等方法对粗样品进一步分离,提纯得到4种六糖和3种八糖片段.其次应用肝素酶Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ复合酶解与HPLC法分析各纯化寡糖的二糖组分,并结合肝素酶Ⅰ底物特异性,初步推断4种六糖和3种八糖的序列结构.在寡糖的糖链两端均含有N-硫酸化二糖,而N-乙酰化二糖分布在糖链当中.应用电喷雾离子阱-飞行时间质谱(ESI-IT-TOF-MS)在负离子模式下进一步表征寡糖并分析其裂解规律.结果表明,各寡糖中均出现大量因SO32-丢失形成的碎片离子峰,六糖中主要有双电荷和三电荷碎片离子峰;在八糖中出现了一系列从双电荷至五电荷的离子峰.各寡糖的双电荷离子峰质荷比进一步确定了上述寡糖的序列结构.六糖的裂解规律表明,裂解主要存在于糖苷键,N-乙酰葡糖胺和糖醛酸上的裂解方式分别为0,2X和0,2Z.本研究提供了切实有效的分离、分析未知结构肝素寡糖序列的新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏峥	福州大学糖生物化学研究所	10	14	3.0	3.0
2	林江慧	福州大学糖生物化学研究所	4	5	2.0	2.0
3	张建伟	福州大学糖生物化学研究所	5	57	3.0	5.0
4	肖晓毛	福州大学糖生物化学研究所	1	2	1.0	1.0
5	高建平	福州大学糖生物化学研究所	2	5	2.0	2.0
6	张惠芳	福州大学糖生物化学研究所	3	6	2.0	2.0