siRNA沉默Id1基因对小鼠骨肉瘤细胞增殖、迁移及凋亡的影响

• 作者: 仇超 刘敏 康权 毕杨 罗光金 罗庆 迭小红
• 来源期刊: 中华小儿外科杂志
• 关键词: 骨肉瘤 RNA,病毒 细胞增殖 细胞迁移分析 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 220-225
• 页数: 6页
• 字数: 4090字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2015.03.014

摘要

目的 探究沉默分化抑制因子1 (Id1)表达对小鼠骨肉瘤(K7M2-WT)增殖、迁移及凋亡的影响及可能的分子机制,为骨肉瘤的治疗提供新的靶点.方法 实验分3组,空白对照组(Control组),细胞未做任何处理;siRNA组重组腺病毒组(AdsiRNA组),用带表达红色荧光蛋白基因的空载体腺病毒感染细胞;simId1重组腺病毒组(AdsimId1组),特异性针对小鼠Id1基因的小干扰RNA重组腺病毒感染细胞.按分组分别处理K7M2-WT,用RT-PCR、Western bolt检测Id1的mRNA水平及蛋白水平表达,MTT法检测细胞增殖,划痕试验、Transwell检测细胞迁移能力,DAPI染色检测凋亡.结果 AdsimId1感染K7M2-WT 3d能沉默骨肉瘤细胞Id1基因mRNA及蛋白水平的表达.MTT显示Control组、AdsiRNA组和AdsimId1组OD值分别为0.520±0.032、0.490±0.010、0.220±0.006.沉默Id1基因抑制K7M2-WT细胞的增殖,相对Control组及AdsiRNA组抑制率分别为58％和55％(P＜O.05).细胞划痕实验结果提示AdsimId1组细胞的迁移较Control组、AdsiRNA组减慢.Transwell实验结果:AdsimId1组的穿膜细胞数为(44.7±3.7)个,显著少于Control组(100.3±3.8)个及AdsiRNA组(103.8±4.4)个(P＜0.05).AdsimId1组细胞凋亡较Control组、AdsiRNA组明显.结论 沉默Id1基因使骨肉瘤细胞增殖和迁移能力减弱,增强骨肉瘤细胞的凋亡,为骨肉瘤治疗提供新的靶点.