摘要:
目的 观察与探讨生长抑素减轻小鼠胰岛移植过程中胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤及其机制.方法 (1)体外实验:选取20只雄性BALB/C小鼠,采用随机数字表法分为生长抑素组和生理盐水组,每组10只.在获取胰岛手术麻醉前30 min,生长抑素组小鼠腹腔注射生长抑素10μg/g,生理盐水组注射等体积的生理盐水,然后分别收集两组小鼠的胰腺外分泌细胞及胰岛细胞,流式细胞仪检测两种细胞凋亡情况.(2)体内实验:获取小鼠胰岛及胰腺外分泌细胞,并对胰岛进行纯度及活性检测.应用链脲佐菌素建立小鼠糖尿病模型,然后进行胰岛移植,分别于小鼠左肾被膜上、下级同时移植胰岛250个及等体积的胰腺外分泌细胞.采用随机数字表法将成功建立胰岛移植模型的40只小鼠平均分为2组,实验组术后腹腔注射生长抑素,连续28 d,对照组术后注射等体积生理盐水,连续28 d.同时两组小鼠分别腹腔注射5乙炔基-2'-脱氧尿苷(EDU)5 μg/g,连续28 d.术后连续监测小鼠血糖;术后第8天,两组小鼠均进行葡萄糖耐量实验(IPGTT);术后10和28 d两组各随机选取10只小鼠分别切除左肾,采用免疫组织化学法检测左肾包膜下抗淀粉酶抗体的表达,采用免疫荧光染色法检测移植胰岛β细胞增殖情况.结果 (1)流式细胞检测结果显示,生长抑素组小鼠胰腺外分泌细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05),两组间胰岛细胞凋亡率的差异无统计学意义(P>0.05);(2)获取的小鼠胰岛纯度及活性均高于95%.胰岛移植后,两组小鼠血糖均恢复正常,对照组较实验组血糖恢复正常时间延迟(P<0.05),对照组的血糖水平明显高于实验组;IPGTT实验结果显示移植物血糖调节功能正常;术后10d实验组和对照组移植物周围均可见抗淀粉酶抗体阳性颗粒,但实验组阳性颗粒数较对照组减少(P<0.05);免疫荧光检测显示,实验组移植胰岛Insulin+ EDU+β细胞数较对照组明显增多(P<0.05).术后28 d,实验组抗淀粉酶抗体阳性颗粒数较对照组明显减少(P<0.05),但与术后10d相比两组均无明显变化(P>0.05),实验组增值的β细胞数仍明显高于对照组(P<0.05),但与术后10天相比两组增殖率均显著降低(P<0.05).结论 生长抑素可以减轻小鼠胰岛移植过程中胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤,这可能与生长抑素诱导小鼠胰腺外分泌细胞的凋亡,抑制胰腺外分泌细胞胰淀粉酶的分泌,以及促进胰岛β细胞增殖等因素有关.