血小板反应蛋白1活性片段VR-10合成多肽对恒河猴脉络膜视网膜内皮细胞增生及迁移的影响

• 作者: 方林 李小芹 梅妍 田润 陈臻
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 凝血酶敏感蛋白1/药物作用 内皮细胞/病理生理学 细胞增殖 细胞迁移抑制
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 274-278
• 页数: 5页
• 分类号: R774.1
• 字数: 5022字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2015.03.015

摘要

目的 观察血小板反应蛋白1(TSP-1)活性片段VR-10合成多肽对恒河猴脉络膜视网膜内皮细胞(RF/6A)增生、迁移的影响.方法 培养RF/6A细胞并将其分为对照组,0.1、1.0、10.0 μg/mlVR-10合成多肽组及1.0 μg/ml TSP-1全肽组.细胞培养后6、12、24、48 h,采用噻唑蓝(MTT)法检测各组RF/6A细胞存活率.细胞培养后24 h,Transwell小室实验检测各组RF/6A细胞迁移抑制率.采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测10.0 μg/mlVR-10合成多肽对细胞中半胱天冬酶(caspase)-3、凋亡相关因子(FAS)蛋白表达的影响.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测10.0 μg/ml VR-10合成多肽对RF/6A细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、FAS配体(FASL) mRNA表达的影响.结果 MTT法检测结果显示,随作用时间延长,干预组RF/6A细胞存活率越低;随VR-10合成多肽浓度增加,RF/6A细胞存活率也越低.以作用48 h时10.0 μg/ml VR-10合成多肽组RF/6A细胞存活率最低,为78％.细胞培养24 h后,10.0 μg/ml VR-10合成多肽组RF/6A细胞迁移抑制率最高,1.0 μg/ml TSP-1全肽组次之.与对照组比较,不同浓度VR-10合成多肽组及1.0 μg/ml TSP-1全肽组RF/6A细胞迁移抑制率均明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测结果显示,在相对分子质量32×103、20×103处可见caspase-3蛋白条带,在相对分子质量48×103处可见FAS蛋白条带.10.0 μg/ml VR-10合成多肽组与对照组RF/6A细胞中caspase-3(t=-66.240、138.813)、FAS(t=163.114)蛋白表达比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR检测结果显示,与对照组比较,10.0 μg/ml VR-10合成多肽组bcl-2 mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(t=-67.419,P=0.000);FASL mRNA表达明显增强,差异也有统计学意义(t=39.365,P=0.001).结论 TSP-1活性片段VR-10合成多肽能抑制RF/6A细胞增生、迁移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梅妍	云南省第一人民医院眼科	33	103	5.0	9.0
2	方林	云南省第一人民医院眼科	17	13	2.0	2.0
3	田润	云南省第一人民医院眼科	9	33	3.0	5.0
4	陈臻	云南省第一人民医院眼科	5	11	2.0	3.0
5	李小芹	云南省第一人民医院眼科	1	0	0.0	0.0