利用原核表达系统制备家蚕非典型嗅觉受体Orco抗原蛋白

• 作者: 于奇 刘庆信 刘朝阳 尹淑艳 崔为正 杨春红 高绘菊
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蚕 原核表达 非典型嗅觉受体 Orco 抗原蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 1194-1200
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2015.11.006

摘要

[目的]探索建立一种有效制备昆虫非典型嗅觉受体Orco抗原的方法,为Orco蛋白组织定位及功能研究奠定基础.[方法]设计带有BamH I和Hind III酶切位点的引物,采用RT-PCR方法扩增家蚕Bombyx mori Orco第4-5跨膜区之间的基因片段,将其与原核表达载体pET-28a(+)双酶切处理后进行连接,然后转化大肠杆菌Escherichia coli感受态细胞DH5 α,重组质粒再转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导表达,用SDS-PAGE检测诱导蛋白,用HisTrap HP亲和层析对诱导表达的大量蛋白进行纯化.[结果]在大肠杆菌原核表达系统中,用IPTG诱导获得了与预测蛋白大小相符的目的蛋白,经SDS-PAGE检测发现目的蛋白以包涵体形式表达,在变性条件下经HisTrap HP亲和层析获得大量可用于抗体制备的纯化蛋白.[结论]利用原核表达系统可获得制备家蚕Orco抗体的抗原蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高绘菊	山东农业大学林学院	62	577	15.0	22.0
2	崔为正	山东农业大学林学院	107	913	18.0	25.0
3	尹淑艳	山东农业大学植物保护学院	30	271	10.0	16.0
4	于奇	山东农业大学林学院	8	30	3.0	5.0
5	刘庆信	山东农业大学林学院	19	60	4.0	7.0
6	杨春红	山东农业大学植物保护学院	8	5	1.0	1.0
7	刘朝阳	山东农业大学林学院	4	22	2.0	4.0