转北美海蓬子胆碱单加氧酶基因(cmo)烟草的获得及耐盐性鉴定

• 作者: 刘增美 朱天艺 王何瑜 龚一富
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 北美海蓬子 胆碱单加氧酶基因(cmo) 转基因烟草 NaCl胁迫 耐盐性
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1310-1317
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.10.006

摘要

胆碱单加氧酶(choline monooxygenase,CMO)是植物甜菜碱合成过程中重要的限速酶.为探讨转北美海蓬子(Salicornia bigelovii)cmo基因烟草(Nicotiana tabacum)在耐盐基因工程中的应用,利用基础质粒pCAMBIA1300UR构建pCAMBIA 1300UR-cmo植物表达载体,通过电击法将重组质粒导入农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105中,并采用农杆菌介导的叶盘转化法转入烟草,经抗生素筛选、PCR和qRT-PCR检测后,对阳性烟草植株进行耐盐性鉴定.结果表明,北美海蓬子cmo基因在烟草中具有80％的转化效率,在200 mmol/L盐胁迫下,转基因植株的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)及脯氨酸(proline,PRO)含量明显高于非转基因的烟草植株,而丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)含量则低于非转基因组.结果表明,cmo基因的转化提高了烟草的耐盐性,为进一步阐明cmo基因在植物体内的甜菜碱合成代谢途径、抗逆调控机制及培育耐盐植物新品种提供基因资源库和理论参考.