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大鼠胚胎肠神经干细胞体外培养的时间选择及鉴定
大鼠胚胎肠神经干细胞体外培养的时间选择及鉴定
作者:
付冬辉
弭杰
陈东
高红
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
干细胞
肠神经系统
细胞分化
大鼠
摘要:
目的 探讨大鼠胚胎肠神经干细胞(ENSCs)体外培养时间的选择.方法 在严格的条件控制下,从盛京医院SPF级动物实验室筛选的VSD大鼠的胎鼠和幼鼠作为研究对象,分别取孕16、18、20 d的胎鼠和生后1d的幼鼠,每组各5只.以其肠管做原代培养,在碱性成纤维生长因子(bFGF)、N2添加剂和B27添加剂联合作用下使其稳定增殖,观察其神经球形成的时间及生长速度,并用10%的胎牛血清诱导其贴壁分化,应用SABC法免疫细胞化学染色检测巢蛋白(Nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、髓磷脂碱蛋白(MBP)和神经微丝200 (NF-200)的表达,对ENSCs及其分化的细胞进行鉴定.结果 孕16d和孕18 d提取的ENSCs于原代培养后第3天形成肠神经球,孕20 d和生后1d提取的ENSCs于原代培养后第5天形成肠神经球.形成的神经球可以进行传代,鉴定为Nestin染色阳性细胞,并可诱导分化为神经元细胞(NF-200染色阳性细胞)、星形胶质细胞(GFAP染色阳性细胞)和少突胶质细胞(MBP染色阳性细胞),说明所培养的细胞为肠神经干细胞.结论 采用无血清培养基加入特定生长因子的培养技术,可培养出在体外稳定增殖并有多向分化潜能的大鼠胚胎ENSCs;对于ENSCs体外培养取材时机,选择孕18 d大鼠胚胎为宜.
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神经干细胞
细胞分化
大鼠
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体外培养
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文献信息
篇名
大鼠胚胎肠神经干细胞体外培养的时间选择及鉴定
来源期刊
中华小儿外科杂志
学科
关键词
干细胞
肠神经系统
细胞分化
大鼠
年,卷(期)
2015,(3)
所属期刊栏目
实验研究
研究方向
页码范围
226-229
页数
4页
分类号
字数
3788字
语种
中文
DOI
10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2015.03.015
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
高红
中国医科大学附属盛京医院小儿外科
136
641
12.0
17.0
2
弭杰
中国医科大学附属盛京医院小儿外科
13
14
3.0
3.0
3
陈东
中国医科大学附属盛京医院小儿外科
16
19
2.0
3.0
4
付冬辉
中国医科大学附属盛京医院泌尿外科
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肠神经系统
细胞分化
大鼠
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华小儿外科杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
0253-3006
CN:
42-1158/R
开本:
大16开
出版地:
武汉市胜利街155号
邮发代号:
38-19
创刊时间:
1980
语种:
chi
出版文献量(篇)
8600
总下载数(次)
20
总被引数(次)
37634
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