激活 Nodal 信号通路促进小鼠胚胎干细胞向定型内胚层分化

• 作者: 于涛 单体栋 夏忠胜 欧阳慧 袁宇红 钟娃 陈其奎
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Nodal信号通路 小鼠胚胎干细胞 定型内胚层 细胞分化
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: ? 论 著?
• 页码范围: 2070-2075
• 页数: 6页
• 分类号: Q291|R363
• 字数: 3468字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.11.024

摘要

目的：探讨激活Nodal信号通路在小鼠胚胎干细胞（ embryonic stem cells，ESC）向定型内胚层（ de－finitive endoderm，DE）分化中的作用，寻找小鼠ESC向DE分化的最佳培养体系。方法：根据培养基的不同，实验分为3组：胚胎干细胞组（基础培养＋LIF）、自然分化组（基础培养基）和activin A组（基础培养基＋50μg／L activin A）。细胞培养1～7 d，收集不同作用时点（1、3、5、7 d）的细胞及细胞爬片。用流式细胞术检测CXCR4阳性细胞的比例；免疫细胞化学法检测CXCR4蛋白的表达；Western blot检测OCT4及CXCR4蛋白的表达。结果：流式细胞术检测结果提示，随着培养时间的延长，CXCR4阳性细胞的比例，胚胎干细胞组在1～7 d无明显变化，自然分化组和activin A组逐渐增高，第5天达高峰（P＜0．05），其中activin A组最高（P＜0．05）。细胞免疫组化结果显示CX－CR4阳性细胞呈棕褐色或棕黄色。 Western blot的结果提示，随着培养时间的延长，胚胎干细胞组OCT4和CXCR4蛋白表达无明显变化；自然分化组和activin A组的CXCR4蛋白的表达逐步增高，OCT4蛋白的表达逐步下降，第5天达高峰（P＜0．05），其中activin A组的表达最明显（P＜0．05）。结论：在小鼠ESC分化过程中，在诱导培养的第5天， DE的比例最高。激活Nodal信号通路可以促进小鼠ESC向具有CXCR4分子标志的DE分化，有利于获取更多的DE细胞。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于涛	中山大学孙逸仙纪念医院消化内科	30	132	5.0	10.0
2	袁宇红	中山大学孙逸仙纪念医院消化内科	17	94	6.0	9.0
3	陈其奎	中山大学孙逸仙纪念医院消化内科	70	498	12.0	19.0
4	欧阳慧	中山大学孙逸仙纪念医院消化内科	11	115	4.0	10.0
5	夏忠胜	中山大学孙逸仙纪念医院消化内科	32	147	8.0	9.0
6	钟娃	中山大学孙逸仙纪念医院消化内科	33	147	6.0	10.0
7	单体栋	中山大学孙逸仙纪念医院消化内科	2	4	1.0	2.0