小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1对脐静脉内皮细胞增殖、迁移和凋亡的影响

• 作者: 哈小琴 孙慧燕 曹晓培 杨月峰 王华 王立生 肖凤君 高瞻
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脐静脉内皮细胞 小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 411-416
• 页数: 6页
• 分类号: R963
• 字数: 4254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2015.03.011

摘要

目的 探讨小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1(SENP1)对脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移及凋亡的影响.方法 用20个感染复数的pLKO.1-SENP1-小发夹RNA(shRNA)-绿色荧光蛋白(GFP)干涉慢病毒(SENP1干涉组)和pPIG-U6-随机序列(scramble)-GFP对照慢病毒(GFP-SC对照组)感染HUVEC.病毒感染HUVEC 48 h后,用流式细胞仪检测慢病毒的感染效率,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western蛋白质印迹法检测HUVEC内SENP1基因和蛋白表达水平.用CCK8试剂盒检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞的迁移能力,流式细胞仪分析细胞凋亡率.结果 GFP-SC对照组和SENP1干涉组感染效率均＞97％.与GFP-SC对照组比较,SENP1干涉组HUVEC SENP1基因和蛋白表达水平显著降低(P＜0.01).CCK8法测定结果表明,SENP1干涉组HUVEC增殖能力较GFP-SC对照组明显降低(P＜0.01).SENP1干涉组细胞迁移过Transwell小室的细胞数量明显低于GFP-SC对照组(P＜0.01).用低浓度血清(含2％胎牛血清)培养基诱导细胞凋亡24 h,SENP1干涉组细胞凋亡率即已升高到GFP-SC对照组的2倍左右(P＜0.05);诱导凋亡至48 h,SENP1干涉组细胞凋亡率升高到对照组的3.2倍左右(P＜0.05).结论 HUVEC内SENP1表达水平的降低不仅可以显著抑制细胞增殖和迁移能力,亦可促进细胞凋亡.