M cl－1信号通路阻断剂对 H37 Rv 感染小鼠巨噬细胞凋亡的影响

• 作者: 吴江东 吴芳 季榕 张万江 张宇晴 王婵 王小芳 王新敏 王飞雨 章乐 赵瑾
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Mcl-1 细胞凋亡 结核分枝杆菌 H37Rv 巨噬细胞
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: ? 论 著?
• 页码范围: 2059-2064
• 页数: 6页
• 分类号: R378.91+1|R363
• 字数: 4453字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.11.022

摘要

目的：探讨Mcl－1信号通路阻断剂在结核分枝杆菌H37Rv感染小鼠模型中对Mcl－1表达、巨噬细胞凋亡情况及结核分枝杆菌的影响。方法：小鼠腹腔注射H37 Rv菌悬液，建立感染小鼠模型，针对Mcl－1的信号通路选用JAK／STAT信号通路阻断剂AG490、MAPK信号通路阻断剂PD98059和PI3K信号通路阻断剂LY294002用腹腔注射方式作用于各组感染小鼠模型，分为H37Rv感染组、AG490处理组、PD98059处理组、LY294002处理组和对照组。通过细胞抗酸染色观察结核分枝杆菌H37Rv感染小鼠腹腔巨噬细胞的动物模型是否建立成功；通过免疫细胞化学检测结核分枝杆菌H37Rv感染巨噬细胞的Mcl－1表达情况，使用流式细胞技术检测各组巨噬细胞的凋亡率，采用结核分枝杆菌菌落计数来判断巨噬细胞凋亡对结核分枝杆菌的清除效果。结果：细胞抗酸染色结果可见感染的巨噬细胞内散在排列的红色短小抗酸结核分枝杆菌。免疫细胞化学结果显示H37Rv感染组、AG490处理组和LY294002处理组中的Mcl－1蛋白为强阳性表达，PD98059处理组中Mcl－1蛋白为弱阳性表达，对照组Mcl－1蛋白为阴性表达。流式细胞术检测发现H37Rv感染组巨噬细胞凋亡率较对照组高，PD98059处理组的凋亡率显著高于各组，差异显著（P＜0．05）。结核分枝杆菌菌落计数结果显示PD98059处理组对H37Rv菌株抑菌作用最明显。结论：Mcl－1信号通路阻断剂通过抑制JAK／STAT、MAPK和PI3K信号通路增加结核分枝杆菌H37Rv感染巨噬细胞的凋亡率，抑制结核分枝杆菌生长；其中，MAPK信号通路干扰Mcl－1的作用最明显，感染的巨噬细胞凋亡率最高，抑菌作用最强。