脂肪因子chemerin对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响

• 作者: 丁敏 冯书红 徐俊 李雪梅 王鹏华 翟丽东
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 脂肪因子类 3T3-L1细胞 细胞增殖 慢病毒属 丝裂原活化蛋白激酶1
• 年，卷（期）: 2015,（26）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2099-2103
• 页数: 5页
• 字数: 3606字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2015.26.013

摘要

目的 探讨脂肪因子chemerin对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响及可能机制.方法 制备小鼠chemerin过表达及RNA干扰重组慢病毒,感染3T3-L1细胞.实验设chemerin基因沉默组、沉默空载体对照组、过表达组、过表达空载体对照组.另在细胞增殖实验中增设细胞外信号调节激酶(ERK)阻断剂组.应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法联合5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法观察chemerin对3T3-L1细胞增殖的影响;实时定量PCR检测chemerin、ERK1/2及细胞周期蛋白(cyclin)D1基因mRNA表达;Western印迹法检测chemerin、ERK1/2及磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白水平.结果 MTT及BrdU掺入实验结果显示:与过表达对照组相比chemerin过表达后吸光度(A)值升高(1.09±0.08比0.90±0.09,P＜0.05),BrdU掺入量增加[(126.5±14.6)％比(100.0±7.0)％,P＜0.05],此效应可被ERK1/2信号通路阻滞剂PD98059抑制,A值(0.91±0.13)及BrdU掺入量(104.3±10.7)％降低,与过表达组相比差异均有统计学意义(均P ＜0.05);与沉默对照组相比,chemerin基因沉默后A值降低(0.72 ±0.11比0.90 ±0.09,P＜0.05),BrdU掺入量减少[(77.6±11.8)％比(99.7±6.3)％,P＜0.05];实时定量PCR结果显示:chemerin过表达后与其空载对照组相比chemerin、ERK1/2、cyclinD1表达上调(2.77 ±0.31比1.01 ±0.12,1.39±0.19比0.76±0.30,1.46±0.14比0.88±0.14,1.44±0.17比1.03±0.15,均P＜0.05);chemerin基因沉默后均表达下调(0.35±0.12比1.25±0.31,0.64±0.15比1.03±0.14,0.56±0.10比1.06±0.29,0.66 ±0.13比1.09±0.19,均P＜0.05);Western印迹结果显示:chemerin过表达后与其空载对照组相比chemerin、ERK1/2及p-ERK1/2蛋白水平增加(2.18±0.32比1.18±0.14,1.37±0.05比0.97±0.12,1.06±0.09比0.56 ±0.08,均P＜0.05),chemerin基因沉默后与其对照组相比chemerin、ERK1/2及p-ERK1/2蛋白水平降低(1.00±0.07比1.40±0.17,0.87±0.15比1.20 ±0.12,0.49±0.07比0.91±0.11,均P＜0.05).结论 chemerin可促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,其机制可能是通过上调ERK1/2信号通路实现.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翟丽东	天津医科大学基础医学院人体解剖和组织胚胎系	15	71	6.0	7.0