液质联用多反应监测法定量肝纤维化非实质细胞中的ATPA蛋白质

• 作者: 刘晓茜 吕建新 尹林 张丽军 张姣丽 贾小芳
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白质 多反应监测 定量 液相色谱串联质谱
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 35-39
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3519字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-548X.2015.02.010

摘要

目的 建立液质联用多反应监测方法定量复杂样品中的蛋白质.方法 合成标准多肽,建立较通用的蛋白质多肽定量方法;挑选目标蛋白质及其定量离子对.采用SDS-PAGE方法分离复杂样品中的蛋白质,切取目标蛋白质条带进行胶内酶解和液质联用MRM定量,运用定量PCR方法分析目标蛋白在蛋白质和mRNA水平的一致性.结果 选择在二维凝胶电泳中具有3倍差异的ATPA蛋白质进行了MRM定量分析,ATPA的4条多肽513.8、586.4、644.5和777.3对应的10个离子对均能特异地被质谱MRM方法检测,与正常对照相比,酒精性肝纤维化样本中ATPA的10个离子的曲线下面积变化基本一致,均表现为上调.MRM定量结果也表明ATPA在酒精性肝纤维化样品中上调了3.19倍,与二维凝胶电泳检测结果一致.进一步的定量PCR分析结果显示,该蛋白质的表达变化同步发生在mRNA和蛋白质水平.结论 本研究构建了一种简单有效的液质联用MRM定量SDS-PAGE分离的复杂样品中蛋白质的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾小芳		2	3	1.0	1.0
2	尹林		1	0	0.0	0.0
3	刘晓茜		1	0	0.0	0.0