二斑叶螨多重抗性品系最优内参基因的筛选及CYP392A亚家族基因的表达分析

• 作者: SHEN Hui- 周兴隆 张新虎 杨顺义 沈慧敏 王进军 郝雨
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 二斑叶螨 多重抗性 内参基因 CYP392A亚家族 基因表达量 RT-qPCR
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 毒理与抗性
• 页码范围: 1229-1236
• 分类号: Q965.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2015.11.010

摘要

[目的]筛选出二斑叶螨Tetranychus urticae Koch抗甲氰菊酯、阿维菌素及螺螨酯混剂的实时定量PCR最优内参基因.[方法]选取5.8S rRNA,α-tubulin,TBP,β-actin,ELFn,RPL13a,GAPDH和SDHA 8个候选内参基因,以GeNorm,BestKeeper和Normfinder 3个软件分析这8个基因在二斑叶螨多重抗性品系中的表达稳定性,并以筛选的内参基因分析二斑叶螨P450酶系CYP392A亚家族基因的表达水平.[结果]经GeNorm,BestKeeper和Normfinder 3个软件综合评价确定ELFn基因为二斑叶螨敏感品系(susceptible strain,SS)和多重抗性品系(multi-pesticide resistant strain,Mp-R)各发育阶段的最优内参基因.以ELFn为内参基因对二斑叶螨CYP392A亚家族16个基因表达量进行分析,结果表明:经多重抗性选育40代后,Mp-R品系卵期CYP392A1表达量显著上调;CYP392A16基因在各发育阶段表达量极显著高于SS品系相应发育阶段;其他基因表达量在敏感品系和抗性品系之间差异不显著.[结论]筛选出了SS和Mp-R品系中各发育阶段最佳内参基因为EFLn;Mp-R品系CYP392A亚家族16个基因的表达量在幼螨和若螨阶段低于卵与成螨阶段,其中CYP392A16基因在二斑叶螨多重抗性的形成中起主要作用.该结果为二斑叶螨多重抗性研究奠定了一定基础.