红球菌来源QsdA型N-酰基高丝氨酸内酯酶水产养殖饲用潜力分析

• 作者: 周志刚 姚斌 宋水山 张美超 徐俐 杨雅麟
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 红球菌 N-酰基高丝氨酸内酯酶 重组表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 页码范围: 540-548
• 页数: 9页
• 分类号: S963.7
• 字数: 6761字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2015.71

摘要

通过研究 QsdA 型 N-酰基高丝氨酸内酯酶酶学性质来评估其饲用潜力.研究通过提取红球菌(Rhodococcus erythropolis)BLJF-1的基因组,利用 PCR技术克隆得到N-酰基高丝氨酸内酯酶基因qsdA- rh5.构建重组表达载体pET28a/qsdA-rh5转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选得到具有N-酰基高丝氨酸内酯酶活性的转化子即为重组菌株, 随后经Ni-NTA柱纯化得到的重组蛋白QsdA-RH5进行补充酶学性质的研究.结果表明,克隆得到972 bp的目的基因.构建重组载体,筛选得到重组菌株经诱导表达后得到具有N-酰基高丝氨酸内酯酶活性的目的蛋白即QsdA-RH5,经分析表明,该蛋白的理论分子量为36 kD,属于金属依赖性水解酶PET超家族.酶学性质研究表明:其最适作用 pH为 8.0,作用温度为 35℃,在 pH 6—11内能够稳定的存在,在10—40℃,酶活性能够维持在 80%以上,且该酶对多种金属离子、化合物具有很好的抗性.该融合蛋白具有较为专一的底物特异性, 只对没有取代基团的底物具有水解作用, 以 C7-HSL 为底物时的Km值为0. 0125 mmol/L.实验经酶学性质研究表明,该酶具有较为专一的底物特异性,因此可具有针对性的控制外源性病原菌毒性效应对维护畜禽 (水产)消化道健康方面具有一定的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋水山	河北省科学院生物研究所	44	172	8.0	10.0
2	杨雅麟	中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点试验室	20	214	7.0	14.0
3	姚斌	中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点试验室	111	2079	24.0	42.0
4	周志刚	中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点试验室	26	254	10.0	15.0
5	徐俐	中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点试验室	4	3	1.0	1.0
6	张美超	中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点试验室	5	21	3.0	4.0