家蚕吡哆醛激酶基因干扰降低转氨酶基因的转录表达

• 作者: 姚丽丽 张剑韵 杨欢欢 黄龙全
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蚕 吡哆醛激酶 磷酸吡哆醛 siRNA 荧光定量PCR 转氨酶
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 1273-1277
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2015.12.001

摘要

[目的]维生素B6在氨基酸代谢中是多种酶的辅酶,维持氨基酸代谢的正常运行.磷酸吡哆醛(pyridoxal-5'-phosphate,PLP)是维生素B6的主要辅酶形式,吡哆醛激酶(pyridoxal kinase, PLK)是PLP的重要生成酶,本研究试图明确PLK基因与PLP依赖酶之间转录水平的调节关系.[方法]本研究采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)方法对家蚕Bombyx mori的PLK基因进行干扰,通过体外合成PLK基因的3个干扰片段(siRNA1,siRNA2和siRNA3),将siRNA从体腔注入5龄第3天的家蚕幼虫体内诱导RNAi.利用荧光定量PCR测定不同干扰片段、不同时间点及不同组织中PLK基因表达量的变化;并测定家蚕体内磷酸丝氨酸转氨酶(phosphoserine aminotransferase,SerB)和天门冬氨酸氨基转移酶(asparate aminotransferase, AST)基因的表达量.[结果]注射干扰片段后48 h干扰效果达到最佳.3个干扰片段干扰效果从高到低依次为siRNA1,siRNA2和siRNA3.RNAi效果最好的是中肠组织,其PLK基因的相对表达量下降了55％.RNA干扰PLK基因后,后部丝腺中SerB和AST基因相对表达量分别下降了90％和29％.[结论]本研究通过RNAi实现了家蚕PLK基因干扰,并进一步证明了家蚕PLK基因和SerB基因及AST基因存在联动调节关系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张剑韵	安徽农业大学外国语学院	36	305	11.0	16.0
2	黄龙全	安徽农业大学茶与食品科技学院	37	305	11.0	16.0
3	杨欢欢	安徽农业大学茶与食品科技学院	2	2	1.0	1.0
4	姚丽丽	安徽农业大学茶与食品科技学院	2	2	1.0	1.0