新城疫病毒 Lasota 株基因组全长 cDNA 的构建与序列分析

• 作者: 于宗幸 刘成倩 易建中 李红 王静 范兴琼 陈磊
• 来源期刊: 上海农业学报
• 关键词: 新城疫病毒 Lasota 毒株 基因组全长 cDNA RT-PCR 重组质粒
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 22-25
• 页数: 4页
• 字数: 2778字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15955/j.issn1000-3924.2015.02.05

摘要

将 Lasota 病毒 RNA 反转录为 cDNA，按照 GenBank 上公布的 Lasota 基因组序列（AF 077761）设计了5对引物进行全基因组的扩增（RT-PCR），并将各个片段连于克隆载体 pMD18-T，获得高拷贝的基因序列，然后通过酶切连接将测序正确的各个片段连接到 pET-30a 载体。PCR 分片段扩增、酶切鉴定及测序结果表明，所构建的 Lasota 全基因组 cDNA 基因序列正确，连入载体的位置与预期完全一致。