BTG2基因干扰重组慢病毒的制备及在A549细胞中的表达鉴定

• 作者: 张志敏 张辉 杨镇州 王东 王阁 罗佳 肖何 陈川
• 来源期刊: 四川医学
• 学科: 生物学
• 关键词: BTG2 慢病毒 A549细胞
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 肿瘤与放射治疗学专题
• 页码范围: 795-798
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3417字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16252/j.cnki.issn1004-0501-2015.06.009

摘要

目的：用已构建好的 BTG2-siRNA重组的慢病毒表达载体包装成具有感染性的慢病毒颗粒，获得稳定BTG2-siRNA表达的 A549细胞。方法构建的 BTG2-siRNA 慢病毒表达载体，经测序后证实与标准序列一致。将BTG2-siRNA慢病毒表达载体与其他两种慢病毒包装载体质粒共转染293T细胞，获得BTG2基因siRNA重组慢病毒。感染A549细胞后，用25μg/mL的嘌呤霉素筛选稳定干扰BTG2表达的A549细胞。 CCK8法检测感染BTG2干扰慢病毒的A549细胞的增殖能力变化。结果 Western blot检测提示感染BTG2-siRNA慢病毒的A549细胞总蛋白中BTG2表达要明显低于正常的A549细胞。 CCK8实验显示，感染BTG2干扰慢病毒的A549细胞的增殖能力增加。结论成功制备了BTG2基因siRNA重组慢病毒颗粒，感染A549细胞后可检测到BTG2蛋白的表达明显降低。为进一步研究BTG2基因在恶性肿瘤中的生物学功能与相关机制的研究奠定了基础。