农杆菌介导菜豆几丁质酶基因转化洋桔梗

• 作者: 付晓佳 李琳 杨燕燕 陈崇顺 韦银凤
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 洋桔梗 几丁质酶基因 遗传转化 真菌病害
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 遗传育种?生理生化
• 页码范围: 512-519
• 页数: 8页
• 分类号: Q943.2
• 字数: 7670字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2015.03.008

摘要

通过农杆菌介导法将抗真菌的几丁质酶基因转入洋桔梗，以提高其对真菌病害的抗性。结果表明，成功克隆了抗真菌活性较强的菜豆几丁质酶基因，构建了植物表达载体，并对洋桔梗Double Mariachi Pink叶块进行转化，获得了卡那霉素抗性植株，对抗性植株进行了2次PCR检测( nptⅡ基因)，第1次PCR检测获得了13个阳性株系，培养60 d后再进行第2次PCR检测，获得11个阳性株系，再对生长良好的5个转基因株系进行RT-PCR检测，获得了3个阳性株系。3个阳性株系的几丁质酶平均活性(0.215 U、0.225 U和0.286 U)均显著高于未转化植株(0.133 U)，转基因株系几丁质酶粗提液对大豆链霉菌5A、5E和灰葡萄孢菌3种指示真菌的抑菌圈直径均显著大于未转化植株，其中抑菌效果最好的株系对上述3种指示真菌的抑菌圈直径与对照相比，分别增大了106.00％、90.91％和71.53％。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李琳	南京师范大学生命科学学院江苏省生物多样性与生物技术重点实验室	9	7	2.0	2.0
2	陈崇顺	南京师范大学生命科学学院江苏省生物多样性与生物技术重点实验室	11	78	6.0	8.0
3	杨燕燕	南京师范大学生命科学学院江苏省生物多样性与生物技术重点实验室	3	20	2.0	3.0
4	韦银凤	南京师范大学生命科学学院江苏省生物多样性与生物技术重点实验室	2	1	1.0	1.0
5	付晓佳	南京师范大学生命科学学院江苏省生物多样性与生物技术重点实验室	1	0	0.0	0.0