H7亚型和N9亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立

• 作者: 曾婷婷 罗思思 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: H7亚型禽流感病毒 N9亚型禽流感病毒 反转录环介导等温扩增 可视化检测
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1176-1183
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4678字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.07.014

摘要

应用反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立一种H7亚型和N9亚型禽流感病毒(AIV)可视化快速检测方法.根据GenBank中H7亚型和N9亚型AIVHA和NA基因序列,在其保守区域设计筛选出H7亚型和N9亚型AIV的特异性LAMP引物各一套,优化反应条件,建立能检测H7亚型和N9亚型AIV RT-LAMP方法,并进行特异性和敏感性检验.结果显示,该法用实时浊度仪63℃反应1h,能特异性地检测H7亚型和N9亚型AIV,而对其他15个H亚型和8个N亚型的AIV和禽类呼吸道病原体均无扩增,最低能检出10拷贝·μL-1目的基因.所建立的H7亚型和N9亚型RT-LAMP方法特异性强、敏感性高,结果可视化,操作简便、快速,为H7、N9和H7N9亚型AIV的有效防控提供技术支撑,具有较好的应用前景.