二甲双胍通过抑制核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6)调节体外人颗粒细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达

• 作者: 张永芳 徐仙 李昕 王永峰 王燕蓉 王蒙蒙 裴秀英 马会明
• 来源期刊: 生殖与避孕
• 学科: 医学
• 关键词: 二甲双胍 核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6k) 胰岛素受体底物-1(IRS-1) 人颗粒细胞
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 146-153
• 分类号: R711.6
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨二甲双胍对核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6k)及胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白及其ser307位点磷酸化表达的影响.方法:利用0.1mmol/L二甲双胍体外连续作用多囊卵巢综合症(PCOS)患者黄素化颗粒细胞24 h为实验组,设未加二甲双胍培养的颗粒细胞为对照组.通过RT-PCR和Real-time PCR检测P70S6k和IRS-1的表达,细胞免疫荧光化学和Western blotting的方法检测P70S6k、p-thr389-P70S6k、IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白的表达.结果:Real-time PCR结果显示实验组P70S6k和IRS-1 mRNA水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).细胞免疫荧光化学检测IRS-1和p-ser307-IRS-1蛋白在颗粒细胞胞质表达,P70S6k和p-thr389-P70S6k蛋白在细胞核表达.Western blotting法结果显示二甲双胍作用24 h前、后卵巢颗粒细胞P70S6k、p-thr389-P70S6k、IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白表达有统计学差异(P＜0.05),灰度值分析显示添加二甲双胍组P70S6k、p-thr389-P70S6k蛋白表达显著升高,IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白表达显著下降(P＜0.05).结论:二甲双胍可抑制人颗粒细胞P70S6k的表达,并通过Akt/P70S6k/IRS途径调节IRS-1的表达,从而增加颗粒细胞胰岛素的敏感性.