辣椒酵母单杂交系统的建立及调控CaWRKY40表达的转录因子分离

• 作者: 刘艳艳 唐倩 张杨文 文嘉瑜 杨晟 申磊 石兰平 蔡金森 黄雪盈
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 病原菌 高温 启动子 酵母单杂交 调控因子WRKY
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 918-925
• 页数: 8页
• 分类号: S641.3
• 字数: 5659字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2015.05.015

摘要

辣椒CaWRKY40的转录表达受到病原菌和高温的诱导并在辣椒抗青枯病以及耐高温中起着重要的作用,但其应答青枯菌侵染和高温胁迫表达的调节机制还不清楚.为了进一步分离调节CaWRKY40表达的转录因子,建立辣椒酵母单杂交cDNA文库,以CaWRKY40启动子的青枯病原菌及高温应答区域CaWRKY40p(W40p)为诱饵,筛选cDNA文库,共获得56个阳性克隆.序列分析结果表明,有27个克隆为非重复序列,对其推定氨基酸序列进行同源比对和功能结构域分析,发现有1个推定转录因子,即ARF(Auxin response factor),以及其他蛋白如eIF(Eukaryotic initiation factor,真核起始因子),EF(延伸因子,Elongation factor)等.进一步通过染色质免疫共沉淀验证这些转录因子与W40p的结合.剖析CaWRKY40表达的分子机制有利于深入解析CaWRKY40介导的辣椒抗病及耐高温分子机制.