三种奶牛常见病菌多重PCR诊断方法的建立

• 作者: 张婷 高瑞娜
• 来源期刊: 畜牧兽医杂志
• 关键词: 奶牛 布鲁氏菌 牛分枝杆菌 炭疽杆菌 多重实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 15-18,22
• 页数: 5页
• 分类号: S854.43
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank公布的布鲁氏菌Bcsp31、牛分枝杆菌pncA、炭疽杆菌capA三种特异基因的保守序列分别设计引物,在引物前添加通用引物(Tag),建立3种奶牛常见病菌的多重实时荧光定量PCR方法;通过构建3种病菌PCR扩增目的基因的质粒用于制备标准品进行敏感性验证;利用大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌用于特异性试验,并对30份样本进行了检测.结果表明,本研究构建的多重实时荧光定量PCR检测时间仅需2h,灵敏度为100个拷贝/uL,与其它细菌无交叉反应,特异性为100％,阳性检出率为88.89％.因此,本试验成功建立了检测3种奶牛常见病菌早期诊断的方法,可以在奶牛养殖中应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张婷		20	52	4.0	6.0
2	高瑞娜	朔州职业技术学院生物工程系	5	3	1.0	1.0