布鲁菌 S2疫苗株的核酸探针检测方法的建立

• 作者: 安维雪 宫利娜 张岩 李建 李旭东 申之义 高航飞
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 布鲁菌 检测技术 斑点杂交
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 51-54
• 页数: 4页
• 分类号: S855.12
• 字数: 3527字
• 语种: 中文

摘要

为了鉴别布鲁菌疫苗免疫和自然感染，建立鉴别布鲁菌 S2疫苗株与其他菌株的斑点杂交法。针对布鲁菌基因序列保守区 S2疫苗株与其他菌株的差异设计探针，同时根据差异部分设计引物进行 PCR扩增；PCR 产物经过回收、纯化、变性后固定在 NC 膜上，与探针杂交、显色。结果显示，PCR 引物能够对 S2疫苗株扩增出约330 bp 的核酸片段，对其他布鲁菌扩增出约360 bp 的核酸片段；探针只能和 S2疫苗株的PCR 产物杂交，最低检测到10 pg DNA，能够在10 h 内鉴别出布鲁菌 S2疫苗株。