靶向EBV阳性鼻咽癌小环质粒的构建及表达

• 作者: 左瑜芳 廖思海 徐祖敏 陈国强 陈满瑜 黄文林
• 来源期刊: 广东医科大学学报
• 关键词: 小环载体 oriP启动子 干扰素γ 鼻咽癌 EB病毒
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 261-266
• 页数: 6页
• 分类号: R73-35+4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4057.2015.03.005

摘要

目的 构建表达人IFNγ的靶向小环质粒及其对照质粒,并观察其在EBV阳性鼻咽癌细胞中的靶向表达.方法 采用分子克隆的方法构建中间靶向质粒pSP72-oriP-IFNγ-polyA(pSP72-oriP-IFNγ)和对照质粒pSP72-CMV-IFNγ-polyA(pSP72-CMV-IFNγ).对其分别做双酶切,定向克隆于母环质粒p2ΦC31中,构建成p2ΦC31-oriP-IFNγ和p2ΦC31-CMV-IFNγ质粒.转化TOP10细菌后,通过介导分子内重组,降解原核骨架,获取只含目的基因表达盒的靶向小环质粒mc-oriP-IFNγ和对照质粒mc-CMV-IFNγ.将小环质粒分别转染EBV阴性细胞和EBV阳性细胞,采用ELISA方法定量检测小环质粒介导目的基因的靶向表达.结果 构建了靶向性母环质粒p2ΦC31-oriP-IFNγ及其对照质粒p2ΦC31-CMV-IFNγ,并诱导纯化出相应的靶向性小环质粒mc-oriP-IFNγ及其对照质粒mc-CMV-IFNγ,通过转染真核细胞,检测出靶向性小环质粒能够介导IFNγ在EBV阳性鼻咽癌细胞中特异表达.结论 成功构建了靶向性小环质粒mc-oriP-IFNγ,并证明其能够特异性地介导目的基因在EBV阳性鼻咽癌细胞中表达,而在EBV阴性鼻咽癌细胞及正常细胞中不表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	廖思海	广东医学院附属医院肿瘤中心	32	383	9.0	19.0
2	左瑜芳	广东医学院附属医院肿瘤中心	4	43	2.0	4.0
3	陈满瑜	广东医学院附属医院肿瘤中心	5	32	3.0	5.0
4	徐祖敏	广东医学院附属医院肿瘤中心	6	16	1.0	4.0
5	陈国强	广东医学院附属医院肿瘤中心	8	55	3.0	7.0