TNF-α在结肠癌细胞侵袭和迁移中的作用探讨

• 作者: 刘春辉 曹文斌 杨光华 虞向阳 赵鹏 郑阳 陈俊卯
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 结肠肿瘤 肿瘤坏死因子α 肿瘤侵润 细胞运动 肿瘤相关钙信号转导蛋白-2
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 1368-1372
• 页数: 5页
• 分类号: R735.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/j.issn.0253-9896.2015.12.007

摘要

目的：探讨肿瘤坏死因子（TNF）-α对肿瘤相关钙信号转导蛋白（TROP）-2表达的影响及其对细胞侵袭和迁移能力的影响。方法以0、10、20、30、50、100、200μg/L的TNF-α处理人结肠癌HCT-116细胞，采用噻唑蓝（MTT）实验检测细胞存活率。采用Western blot检测TROP-2的表达量。采用划痕实验和Transwell实验检测20μg/L TNF-α处理前后细胞侵袭和迁移能力。借助脂质体Lipofectamine?2000转染TROP-2 siRNA，实时荧光定量PCR和Western blot验证转染后TROP-2的mRNA和蛋白水平。划痕实验和Transwell实验再次检测TNF-α对转染TROP-2 siRNA细胞的侵袭和迁移能力的影响。结果0、10、20、30、50μg/L的TNF-α处理24 h和48 h时细胞存活率差异无统计学意义。100、200μg/L与0μg/L比较，细胞存活率下降（P＜0.05）。与TNF-α浓度为0μg/L比较，10、20、30、50μg/L时TROP-2的表达量均升高，20μg/L时TROP-2的表达量最高（P＜0.05）；而TNF-α浓度为100、200μg/L时TROP-2的表达量下降（P＜0.05）。划痕实验和Transwell实验中,TNF-α组24 h时的细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均较对照组增加（P＜0.05）。转染TROP-2 siRNA后siRNA组中TROP-2的mRNA和蛋白水平均低于正常对照组和阴性对照组（P＜0.05）。此外，siRNA组24 h时的细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均较正常对照组下降（P＜0.05）。结论低浓度炎症因子TNF-α可能通过上调TROP-2的表达来促进结肠癌HCT-116细胞的侵袭和迁移。