BARF1表达下调通过活化 caspase 依赖的线粒体通路诱导 EBV 阳性胃癌细胞凋亡

• 作者: 任永生 刘俊 张雪林 郑新
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: BARF1 EB病毒 胃癌 细胞凋亡 线粒体通路
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: ? 论 著?
• 页码范围: 1970-1978
• 页数: 9页
• 分类号: R730.23
• 字数: 5622字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.11.008

摘要

目的：研究BARF1表达下调对EBV阳性胃癌细胞凋亡的影响，以及BARF1基因沉默介导细胞凋亡的分子机制。方法：siRNA和NCsiRNA分别转染NUGC3和SNU719细胞，运用Western blot测定细胞中BARF1、Bcl－2、Bax、细胞色素C、caspase 3和caspase 9的蛋白表达；RT－PCR测定BARF1、Bcl－2和Bax mRNA的表达；台盼蓝染色法测定细胞存活率；Annexin V－FITC／PI染色法和流式细胞仪测定细胞凋亡；细胞凋亡因子抗体芯片分析细胞中凋亡相关蛋白的表达；线粒体膜电位检测试剂盒测定线粒体膜电位；免疫共沉淀检测细胞中Apaf－1和caspase 9的相互作用。结果：与空白对照组和阴性对照组相比， BARF1基因沉默显著诱导NUGC3和SNU719细胞凋亡，而线粒体膜电位显著降低。 BARF1沉默基因能促进促凋亡蛋白的表达并抑制抗凋亡蛋白的表达，Bcl－2／Bax比例显著降低；而caspase抑制剂能抑制由 BARF1基因沉默介导的细胞凋亡。在 siRNA 转染的细胞中， caspase 3和caspase 9蛋白发生裂解，细胞色素C的浓度显著高于阴性对照组，Apaf－1蛋白与caspase 9蛋白在细胞质中能够发生相互作用。结论：BARF1基因沉默通过线粒体途径调节Bcl－2和Bax蛋白的表达进而诱导NUGC3和SNU719细胞凋亡，并呈caspase通路依赖关系。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘俊	湖北医药学院附属东风医院胃肠外科	86	189	8.0	10.0
2	任永生	湖北医药学院基础医学院	19	78	5.0	7.0
3	郑新	湖北医药学院附属东风医院胃肠外科	5	16	2.0	4.0
4	张雪林	湖北医药学院护理学院	10	57	5.0	7.0