ZHX3基因沉默对BMSCs中成骨相关因子表达的影响

• 作者: 包翠芬 张苗苗 王艳 秦书俭 闵鹤鸣
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: DNA结合蛋白质类 锌指 基因,同源盒 转录因子 基因沉默 间质干细胞 smad3 smad4 RUNX2 转录抑制因子-锌指蛋白和同源框3
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 1356-1360
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/j.issn.0253-9896.2015.12.004

摘要

目的：探讨锌指蛋白和同源框3（ZHX3）基因沉默对骨髓间充质干细胞（BMSCs）中smad3、smad4、RUNX2表达的影响。方法构建ZHX3低表达慢病毒载体并转染大鼠BMSCs（ZHX3沉默组），同时设空载病毒转染BMSCs （载体对照组）及不做任何处理的BMSCs（空白对照组）。荧光显微镜下测定细胞转染率并采用免疫印迹技术鉴定转染是否成功；采用免疫荧光化学和免疫印迹技术定性定量检测ZHX3沉默时smad3、smad4、RUNX2表达情况。结果（1）复苏培养的细胞具有BMSCs表型。（2）转染后，ZHX3沉默组和载体对照组均表达绿色荧光，空白对照组不表达荧光，且沉默组ZHX3基因表达显著低于载体对照组。（3）免疫荧光结果显示，smad3、smad4的阳性表达位于细胞核和细胞质，RUNX2的阳性表达主要定位于细胞核。3组细胞均可见阳性表达细胞，且空白对照组与载体对照组之间荧光强度未见显著差异，但ZHX3基因沉默组的荧光强度显著低于2个对照组。（4）免疫印迹检测smad3、smad4、RUNX2的条带于空白对照组和载体对照组中无显著差异，但均显著高于ZHX3沉默组（P＜0.05）。结论ZHX3基因沉默后BMSCs体外成骨能力延迟，可能通过下调smad3、smad4、RUNX2来发挥作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闵鹤鸣	辽宁医学院细胞生物学教研室	9	38	3.0	5.0
2	王艳	辽宁医学院附属第一医院神经内科	9	25	3.0	4.0
3	包翠芬		2	3	1.0	1.0