羊草脂氧合酶同源蛋白基因 LcLHP 的克隆与表达分析

• 作者: 孙天旭 张旸 李玉花 汤明威 解莉楠 郭勃予
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 羊草 盐碱胁迫 LcLHP RACE 克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 页码范围: 35-42
• 页数: 8页
• 分类号: Q78
• 字数: 6927字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2015.04.007

摘要

为验证羊草脂氧合酶同源蛋白基因 LcLHP 与盐胁迫的关系，利用 RACE（Rapid amplification of cDNA ends）克隆技术从羊草中克隆得到抗盐碱相关基因脂氧合酶同源蛋白基因（LHP，Lipoxygenase homology protein）的 cDNA 全长序列，其 GenBank 登录号为 KJ472894。LcLHP 基因开放阅读框为537 bp，编码178个氨基酸。LcLHP 中含有 PLAT ／LH2结构域，该结构域蛋白家族的许多成员受胁迫诱导。同源性分析显示，LcLHP 与互花米草 PLAT ／LH2家族蛋白脂氧合酶、PLAT 植物胁迫结构域包含蛋白等同源性较高，蛋白功能预测显示其 N 端可能存在信号肽并可能具有酶功能。RT-PCR 分析显示，在一定盐碱胁迫条件下，随着处理试剂 Na2 CO3溶液处理时间的延长，LHP 基因在羊草中的表达量呈单峰趋势，在12 h 时达到峰值；构建重组表达载体 pGEX-LcLHP 并进行 IPTG 原核诱导表达培养，获得了 GST-LcLHP 融合蛋白并用 GST 抗体进行 Western Blot 试验得到验证。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉花	东北林业大学生命科学学院	168	1627	23.0	33.0
2	张旸	东北林业大学生命科学学院	26	254	7.0	15.0
3	解莉楠	东北林业大学生命科学学院	33	146	7.0	11.0
4	孙天旭	东北林业大学生命科学学院	3	2	1.0	1.0
5	郭勃予	东北林业大学生命科学学院	4	10	2.0	3.0
6	汤明威	东北林业大学生命科学学院	5	17	2.0	4.0