丙烯酰胺特异性多克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 句荣辉 段丽丽 温凯 罗红霞
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 丙烯酰胺 合成抗原 ELISA 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 农产品辐照研究·食品科学
• 页码范围: 1979-1984
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2015.10.1979

摘要

为探索油炸食品中丙烯酰胺快速检测方法,利用迈克尔加成反应合成丙烯酰胺半抗原,并利用质谱与核磁法进行结构鉴定.半抗原经重氮化法处理后分别偶联载体蛋白BSA和OVA,并通过MALDITOF-MS进行鉴定.结果表明,与丙烯酰胺标准品和2种载体蛋白相比,偶联物的分子量明显增加,AMBSA偶联物中半抗原对载体蛋白的偶联比约为8.7∶1,AM-OVA偶联物中半抗原对载体蛋白的偶联比约为20∶1,说明偶联成功.通过免疫制备多克隆抗体,间接ELISA法进行抗血清的效价和半抑制率检测,通过交叉反应测定其特异性.结果表明:免疫原为AM-OVA,包被原为AM-BSA测定的抗血清效价最高为1∶100 000倍,其半抑制率(IC50)为74.2 ng·mL-1,该抗体与丙烯酰胺近似物的交叉反应率均＜1.48％.可见,该试验免疫制备的丙烯酰胺多克隆抗体获得了较高的效价及较强的特异性.研究结果为丙烯酰胺快速检测方法的建立奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗红霞		132	460	11.0	16.0
2	段丽丽		22	44	4.0	5.0
3	句荣辉		65	147	6.0	10.0
4	温凯		5	15	3.0	3.0