G 蛋白偶联的内整流型钾通道在哮喘模型大鼠肺组织的表达

• 作者: 刘莉 孙青竹 宁启兰 张富军 杨旭东 王慧莲 蒋晓刚 韩燕
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 哮喘 大鼠 上皮 IL-4 G 蛋白偶联的内整流钾通道
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 317-321
• 页数: 5页
• 分类号: R562.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201503006

摘要

目的：检测 G 蛋白偶联的内整流钾通道(G protein-coupled inwardly rectifying potassium channels,GIRK)在哮喘模型中的表达改变,并寻找调节其表达变化的因素。方法用卵清蛋白和铝佐剂致敏 E3大鼠14 d 后,用卵清蛋白进行攻击以诱导哮喘模型,用磷酸盐缓冲液致敏并攻击的大鼠作为对照,通过观察肺组织病变、总 IgE 水平的改变等手段评价哮喘模型。用 RT-PCR 检测 GIRK 亚基1~4的 mRNA 水平,用 Western blot 等 手 段 检测 大 鼠 肺 组 织 中GIRK1和 GIRK3的蛋白水平,并用免疫组化确定肺组织中 GIRK 表达的解剖部位。根据免疫组化的结果,选用A549细胞株作为模型,用 IL-4刺激,用 PCR、Western blot 等手段检测 IL-4对 GIRK 表达的影响。结果与对照组相比,哮喘模型组肺组织中 GIRK 的 mRNA 水平下降,哮喘模型组肺组织中 GIRK 蛋白水平也下降。免疫组化结果显示,GIRK 在大鼠主要表达于气道上皮。随 IL-4浓度的升高,在 A549细胞中 GIRK 的所有的亚基的表达均呈剂量依赖性下降趋势；选择50 ng/mL IL-4刺 激 A549细 胞,GIRK 的所有的亚基的表达均呈刺激时间依赖性的下降。结论在 E3大鼠哮喘模型中,IL-4下调气道上皮中 GIRK 的表达。