正交设计法优化低频超声联合微泡抑制小鼠前列腺癌细胞血管内皮生长因子表达的实验研究

• 作者: 候瑞 寿文德 张蔚 白文坤 胡兵
• 来源期刊: 临床超声医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 正交设计 低频超声 微泡 血管内皮生长因子 前列腺癌 小鼠
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 577-581
• 页数: 5页
• 分类号: R445.1
• 字数: 3891字
• 语种: 中文

摘要

目的 采用正交实验设计法,探究低频超声联合微泡抑制小鼠前列腺癌细胞(RM-1)血管内皮生长因子(VEGF)表达的最优参数组合.方法 选定超声功率、超声频率、辐照时间、微泡/细胞悬液体积比为正交优化的4个因素,每个因素设定4个水平,分别为超声频率:20 kHz、80 kHz、500 kHz及800 kHz;超声功率:100 mW/cm2、180 mW/cm2、270 mW/cm2及360 mW/cm2;辐照时间:30 s、60s、90 s及120 s;微泡/细胞悬液体积比:10％、20％、30％、40％,按照四因素四水平设计正交实验表,得到16个实验组,各组按相应条件采用连续波辐照后细胞继续培养24h,定量RT-PCR检测各组VEGFmRNA表达量从而获取最优组合条件.将小鼠RM-1细胞均分4组:对照组不进行任何处理;单独超声组采用正交实验设计法所得最优组合条件辐照细胞,但不加入微泡;单独微泡组仅加入最优百分体积的微泡;低频超声联合微泡组采用正交实验设计法所得最优组合条件辐照并加入最优百分体积微泡.各组处理后,即刻台盼蓝染色观察细胞的损伤情况;培养24h后,采用Western blot印迹法检测小鼠RM-1细胞中VEGF表达量.结果 抑制小鼠RM-1细胞VEGFmRNA表达的影响因素由大到小依次为:超声频率、超声功率、微泡/细胞悬液体积比、辐照时间;各因素不同水平的影响程度由大到小依次为:①超声频率:800 kHz、500 kHz、80 kHz、20 kHz;②超声功率:360 mW/cm2、180 mW/cm2、270 mW/cm2、100 mW/cm2;③辐照时间:30 s、90s、120 s、60 s;④微泡/细胞悬液体积比:20％、10％、40％、30％.正交实验设计法所得最优组合条件为:超声频率800 kHz、超声功率360 mW/cm2、超声辐照时间30 s及微泡/细胞悬液体积比20％.低频超声联合微泡组损伤细胞多于其他各组,单独超声组可见少量损伤细胞,对照组和单独微泡组损伤细胞极少.低频超声联合微泡组VEGF表达量少于其他各组,单独超声组表达量也少于对照组和单独微泡组,差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).结论 低频超声联合微泡造影剂抑制小鼠RM-1细胞VEGF mRNA表达的最优组合条件为:超声频率800 kHz,超声功率360 mW/cm2,超声辐照时间30 s,微泡/细胞悬液体积比20％.在此实验条件下可以显著抑制VEGF的最终表达量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡兵	上海交通大学附属第六人民医院超声医学科上海超声医学研究所	185	1278	18.0	26.0
2	寿文德	上海交通大学附属第六人民医院超声医学科上海超声医学研究所	50	286	10.0	14.0
3	张蔚	上海交通大学附属第六人民医院超声医学科上海超声医学研究所	34	111	5.0	9.0
4	白文坤	上海交通大学附属第六人民医院超声医学科上海超声医学研究所	15	41	4.0	5.0
5	候瑞	上海交通大学附属第六人民医院超声医学科上海超声医学研究所	1	4	1.0	1.0