慢病毒介导shRNA干扰结缔组织生长因子表达对百草枯致肺纤维化的影响

• 作者: 刘移民 朱伟 李峰 李艳华 苏艺伟 韦拔雄 高原
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: 百草枯 肺纤维化 慢病毒 结缔组织生长因子
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 359-362
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2015.05.013

摘要

目的 通过慢病毒介导发夹RNA(shRNA)干扰大鼠肺组织中结缔组织生长因子(CTGF)的表达,探索CTGF在百草枯(PQ)致肺纤维化中的作用.方法 设计CTGF-shRNA的表达质粒,并与包装质粒共转染293FT细胞构建慢病毒;将80只SD雄性大鼠随机分成对照组、PQ组、无关序列组和干扰组4组,每组20只,PQ组、无关序列组、干扰组腹腔注射PQ 18 mg/kg,对照组给予等量生理盐水,处理4h后,无关序列组和干扰组分别向气道注入50μl慢病毒液,对照组和PQ组给予50μl生理盐水,各组于处理后7、14、28、56 d分别处死5只大鼠,检测大鼠肺组织CTGF表达以及肺纤维化指标的变化情况.结果 PQ组和无关序列组大鼠在染毒后行为和肺病理改变符合PQ中毒肺损伤的变化过程,两组各实验期CTGF表达量均高于同期对照组(P＜0.05),处理后7d开始升高,CTGF mRNA于28 d时表达量达峰值,而蛋白于56 d时表达量最高;PQ组和无关序列组肺羟脯氨酸值随着处理时间的延长而增加,与同期对照组相比,除14d外,差异均有统计学意义(P＜0.05);而干扰组各实验期CTGF的表达量均明显低于同期PQ组和无关序列组,差异有统计学意义(P＜0.05),其大鼠呼吸系统症状和肺病理损伤程度明显改善,肺羟脯氨酸值降低,处理后56 d肺羟脯氨酸值与PQ组和无关序列组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 慢病毒介导的shRNA干扰能够有效抑制PQ致肺纤维化模型中CTGF的表达,减轻PQ致肺纤维化的程度.