水蜜桃多酚氧化酶分离纯化及其酶学特性研究

• 作者: 刘亮 戚向阳 曹少谦 王如坤 程慧媛 陈伟
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 水蜜桃 多酚氧化酶 纯化 酶学特性
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 农产品辐照研究·食品科学
• 页码范围: 1121-1128
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2015.06.1121

摘要

为建立水蜜桃多酚氧化酶(PPO)高效分离纯化方法,并明确该酶的酶学特性,本研究采用柱层析法对该酶进行分离纯化,对其反应特性及稳定性进行研究.结果表明,Phenyl-Sepharose CL-4B疏水柱层析法对水蜜桃PPO的纯化倍数与硫酸铵分级沉淀法相近,但其得率为89％远高于后者;采用Phenyl-Sepharose CL-4B、DEAE Sepharose Fast Flow和Sephaoryl HR S-200三级柱层析联用的方法对PPO分离纯化,获得PPO总纯化倍数为12.40倍,总得率为20％;该PPO组分经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析得到单一蛋白条带,其分子量为81 kDa.纯化后的水蜜桃PPO对(+)-儿茶素和(-)-表儿茶素的米氏常数分别为0.14 mM和0.12 mM,最适反应pH值为7.0,最适反应温度为40℃.纯化后的水蜜桃PPO对热以及低pH值都很不稳定.本研究结果为进一步研究PPO酶促褐变机制提供了理论指导,同时也为其他果蔬中PPO的分离纯化提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹少谦	浙江万里学院生物与环境学院	46	257	9.0	12.0
2	陈伟	浙江万里学院生物与环境学院	61	485	11.0	19.0
3	戚向阳	浙江万里学院生物与环境学院	87	522	13.0	16.0
4	刘亮	浙江医药高等专科学校生物与食品系	27	193	9.0	13.0
5	王如坤	浙江万里学院生物与环境学院	1	9	1.0	1.0
6	程慧媛	浙江万里学院生物与环境学院	1	9	1.0	1.0