过表达Olig2和Nkx2.2人胚胎干细胞系的建立

• 作者: 姚瑞芹 曲学彬 杨丽华 武秀香 王婷 罗梦娇 马丽
• 来源期刊: 解剖学杂志
• 关键词: Olig2 Nkx2.2 过表达 人胚胎干细胞 克隆
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 645-648
• 页数: 4页
• 字数: 3082字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1633.2015.06.001

摘要

目的:建立过表达Olig2和Nkx2.2的人胚胎干细胞(hESCs)系.方法:利用RT-PCR从鼠N2A细胞克隆出Olig2和Nkx2.2的ORF片段,将Olig2和Nkx2.2基因编码序列分别和带有HA及Flag的载体连接,构建Olig2-HA和Nkx2.2-Flag重组载体.将构建的载体分别与2种病毒辅助包装原件载体质粒共转染293T细胞,制备并浓缩Olig2-HA和Nkx2.2-Flag慢病毒颗粒,感染hESCs,嘌呤霉素筛选的阳性克隆传代培养10代后鉴定细胞内Olig2和Nkx2.2的表达.结果:PCR扩增得到含Olig2和Nkx2.2基因编码序列的特异性条带;携带有Olig2和Nkx2.2基因的慢病毒能够同时感染hESCs,表达Olig2-HA和Nkx2.2-Flag融合蛋白,并稳定遗传.结论:成功构建了同时过表达Olig2和Nkx2.2的人胚胎干细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王婷	徐州医学院细胞生物学与神经生物学教研室	50	150	6.0	9.0
2	曲学彬	徐州医学院细胞生物学与神经生物学教研室	12	25	3.0	4.0
3	罗梦娇	徐州医学院细胞生物学与神经生物学教研室	5	7	2.0	2.0
4	杨丽华	徐州医学院细胞生物学与神经生物学教研室	9	33	4.0	5.0
6	马丽	徐州医学院细胞生物学与神经生物学教研室	3	0	0.0	0.0
9	武秀香	徐州医学院细胞生物学与神经生物学教研室	4	12	2.0	3.0