BDNF转染神经干细胞可降低β-淀粉样蛋白对神经元的毒性

• 作者: 姜晓丹 孙海涛 张凤兰 杨璐军 肖志成 钟慧霖 陈宇新
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: β-淀粉样蛋白 tau蛋白 脑源性神经生长因子 神经干细胞
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2-8
• 页数: 7页
• 分类号: R749.16
• 字数: 6090字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2015.01.001

摘要

目的 探讨神经干细胞(NSCs)转染脑源性神经生长因子(BDNF)后对β-淀粉样蛋白(Aβ)毒性作用的抵抗能力及机制. 方法 用脂质体介导法将BDNF基因转染到C57小鼠NSCs内,经荧光显微镜及ELISA检测转基因NSCs及其分化细胞基因表达情况.体外培养小鼠神经元,将其分成3组:a组为神经元组,b组为神经元与NSCs共培养组,c组为神经元与BDNF转基因NSCs共培养组;每组设2平行组.培养3d后,向其中一平行组加入Aβ40蛋白,作为d、e、f组.通过ELISA和Western blotting检验记录24 h和48 h后神经元生存率以及各组Aβ、总tau蛋白、磷酸化tau蛋白水平. 结果 BDNF转基因干细胞及其子代细胞均有BDNF表达并持续1.5周左右.以a组细胞存活率为参照,24h后d～f组细胞平均存活率分别是51.86％±0.03％、73.68％±0.04％、85.34％±0.01％;48 h后d～f组细胞平均存活率分别是38.76％±0.01％、59.65％±0.04％、75.61％±0.07％;其中d、e组细胞存活率明显低于其他各组,差异有统计意义(P＜0.05).a～c组Aβ蛋白未能检测到,d～f组Aβ蛋白水平较高,组间差异不具有统计学意义(P＞0.05).各组细胞总tau蛋白水平差异不具有统计学意义(P＞0.05).各组磷酸化tau蛋白水平差异有统计学意义(P＜0.05),其中d、e组磷酸化tau蛋白水平显著高于其他各组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 BDNF转基因NSCs可以持续表达BDNF基因产物,降低Aβ对神经元的毒性作用,同时通过减少细胞内磷酸化tau蛋白的水平提高细胞存活率.