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Livin shRNA 表达载体的构建及在胰腺癌细胞的效应研究
Livin shRNA 表达载体的构建及在胰腺癌细胞的效应研究
作者:
吕尚东
季一鸣
张财明
朱敏
王爱东
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
Livin基因
RNA干扰
转染
panc-1细胞
摘要:
目的:构建Livin shRNA真核表达载体,探讨干扰质粒稳定转染的胰腺癌panc-1细胞系效应。方法合成Livin基因干扰序列并定向插入到RNA干扰(RNAi)真核表达载体pGCsilencerTM U6/Neo/GFP/RNAi质粒,通过测序进行鉴定。干扰质粒经脂质体Lipofectamine 2000介导转染panc-1细胞。经G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系。定量RT- PCR检测所筛选克隆Livin mRNA的转录水平,采用western blot验证Livin蛋白表达水平改变。结果测序证明Livin干扰序列及读码框正确,干扰质粒稳定转染的panc-1细胞在倒置荧光显微镜下呈明亮绿色荧光,定量RT- PCR和western blot检测结果显示Livin shRNA序列对胰腺癌细胞系Livin mRNA及蛋白表达均有抑制作用。结论成功构建Livin shRNA真核表达载体,建立Livin shRNA质粒稳定转染的panc-1细胞系可为进一步研究Livin在胰腺癌细胞中的作用奠定基础。
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篇名
Livin shRNA 表达载体的构建及在胰腺癌细胞的效应研究
来源期刊
浙江医学
学科
关键词
Livin基因
RNA干扰
转染
panc-1细胞
年,卷(期)
2015,(9)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
747-749,761
页数
4页
分类号
字数
3322字
语种
中文
DOI
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作者信息
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姓名
单位
发文数
被引次数
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G指数
1
季一鸣
台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院肝胆外科
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张财明
台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院肝胆外科
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2
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朱敏
台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院肝胆外科
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2
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吕尚东
台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院肝胆外科
1
2
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王爱东
台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院肝胆外科
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浙江医学
主办单位:
浙江省医学会
出版周期:
半月刊
ISSN:
1006-2785
CN:
33-1109/R
开本:
大16开
出版地:
浙江省杭州市武林广场浙江省科协大楼十一楼
邮发代号:
32-9
创刊时间:
1979
语种:
chi
出版文献量(篇)
14571
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5
总被引数(次)
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