Livin shRNA 表达载体的构建及在胰腺癌细胞的效应研究

• 作者: 吕尚东 季一鸣 张财明 朱敏 王爱东
• 来源期刊: 浙江医学
• 关键词: Livin基因 RNA干扰 转染 panc-1细胞
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 747-749,761
• 页数: 4页
• 字数: 3322字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建Livin shRNA真核表达载体，探讨干扰质粒稳定转染的胰腺癌panc-1细胞系效应。方法合成Livin基因干扰序列并定向插入到RNA干扰（RNAi）真核表达载体pGCsilencerTM U6/Neo/GFP/RNAi质粒，通过测序进行鉴定。干扰质粒经脂质体Lipofectamine 2000介导转染panc-1细胞。经G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系。定量RT- PCR检测所筛选克隆Livin mRNA的转录水平，采用western blot验证Livin蛋白表达水平改变。结果测序证明Livin干扰序列及读码框正确，干扰质粒稳定转染的panc-1细胞在倒置荧光显微镜下呈明亮绿色荧光，定量RT- PCR和western blot检测结果显示Livin shRNA序列对胰腺癌细胞系Livin mRNA及蛋白表达均有抑制作用。结论成功构建Livin shRNA真核表达载体，建立Livin shRNA质粒稳定转染的panc-1细胞系可为进一步研究Livin在胰腺癌细胞中的作用奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	季一鸣	台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院肝胆外科	2	4	2.0	2.0
2	张财明	台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院肝胆外科	1	2	1.0	1.0
3	朱敏	台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院肝胆外科	1	2	1.0	1.0
4	吕尚东	台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院肝胆外科	1	2	1.0	1.0
5	王爱东	台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院肝胆外科	1	2	1.0	1.0