选择性培养基结合特异引物法分离鉴定家兔肠道脆弱拟杆菌

• 作者: 张晓霄 张煜坤 徐秀容
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: 家兔 脆弱拟杆菌 分离 鉴定
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 58-62
• 页数: 5页
• 分类号: S811.6
• 字数: 3946字
• 语种: 中文

摘要

脆弱拟杆菌作为严格厌氧菌,对培养环境要求苛刻,分离培养有较大难度.试验通过改进的选择性培养结合特异引物方法分离兔源脆弱拟杆菌,并利用16 s rDNA测序对其进行鉴定,为后续研究其与宿主关系奠定基础.试验从健康青年家兔肠道中采集内容物,先接种于含液态选择性培养基的厌氧管中,进行富集培养1～2 d,然后将培养的菌液稀释后接种到选择性培养基平板上,于厌氧罐中培养1～3 d,待长出菌落后,观察菌落形态,挑选符合脆弱拟杆菌菌落特点的单一菌落,培养后提取DNA,以脆弱拟杆菌特异引物进行PCR检测.对扩增出特异条带的菌株,扩增其16 s rDNA序列,并进行测序,测序结果与GenBank中脆弱拟杆菌序列进行比对,以鉴定分离的菌株.结果表明,细菌为大小不一的杆菌,革兰氏染色呈阴性.特异引物PCR产物电泳检测显示,挑取的27株单一菌落中,有7株可以扩增出符合目的片段大小的产物.随机选取两株进行16s rDNA测序,其序列与GenBank中的递交的脆弱拟杆菌序列相似度大于99％,与其他细菌相似度均小于93.43％,可确定分离到的菌株为脆弱拟杆菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐秀容	西北农林科技大学动物科技学院	22	187	8.0	13.0
2	张煜坤	西北农林科技大学动物科技学院	4	29	3.0	4.0