一种从非变性聚丙烯凝胶中回收小片段DNA的方法

• 作者: 侯烁 刘贯山 向小华 吴新儒 焦禹顺 王元英 程亚增
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 非变性聚丙烯凝胶 DNA小片段 二次PCR 改良煮沸法 胶回收
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 68-72
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.05.011

摘要

利用高分辨率的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、纯化特异性小片段DNA的首选方法,也是开展后续多种分子生物学试验的前提.本试验比较了改良煮沸法(液氮研磨+煮沸+低温浓缩)、煮沸法及直取法回收小片段DNA,以回收样品模板进行第二次PCR扩增,结果表明:改良方法回收的DNA的纯度高,特异性好,回收率与经典煮沸法相当.在保证回收产物的特异性时,用低温浓缩法替代乙醇/醋酸钠共沉淀也具有可行性及一定的创新性.