通用引物SPF1/GP6++与SPF1/GP6+聚合酶链式反应检测多型别人乳头瘤病毒敏感度的比较

• 作者: 刘彤 安国 李勇 郭榕
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒 SPF1/GP6+ 通用引物 聚合酶链式反应 宫颈癌
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 882-886
• 分类号: R737.33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2015.09.005

摘要

目的 对比通用引物SPF1/GP6++与SPF1/GP6+ PCR两种方法检测人乳头瘤病毒(HPV)的敏感度和感染型别范围.方法 以包含HPV16全长DNA序列的质粒为模板,应用HPV L1基因型别特异性引物进行PCR扩增,获得15种型别HPV模拟靶基因序列并克隆入pEASY-T1载体,将梯度稀释的重组质粒掺入50 ng正常人基因组DNA,模拟各型别HPV感染的待测样本,对比SPF 1/GP6+和SPF1/GP6++两组通用引物的检测敏感度.进一步在68例人宫颈癌组织DNA样本中进行对比验证.结果 与SPF1/GP6+PCR比较,SPF 1/GP6++ PCR对HPV11,31,34,39,51,52,53,56,58,61和66型别的检测敏感度提高了1到2个数量级,对于HPV16,18,33和35常见感染型别的检测敏感度相似.应用SPF 1/GP6++ PCR检测宫颈癌组织HPV感染的总阳性率为98.5％(67/68),检测到11例双重感染和2例三重感染;而应用SPF1/GP6+ PCR检测的总阳性率为95.6％(65/68),仅检测到7例双重感染.结论 在SPF1/GP6+ PCR基础上建立了SPF1/GP6++ PCR方法,并证实SPF1/GP6++ PCR具有更高的检测敏感度和更广的HPV型别检测范围.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭榕	北京大学第一医院老年科	2	1	1.0	1.0